蛋白濃度計算器是美國AAT Bioquest設(shè)計的一種在線即時濃度計算工具，以方便研究人員準(zhǔn)確、便捷的進(jìn)行濃度計算。

如果已經(jīng)知道蛋白分子量和摩爾吸收系數(shù)，可以根據(jù)比爾-朗伯定律，計算溶液中蛋白的濃度。λ_max 指的是吸收最強(qiáng)值所對應(yīng)的波數(shù)，對于蛋白來說，最大吸收波數(shù)一般使用 280 nm。最大吸收波長處的吸光率可以通過分光光度儀來測量，在測定蛋白的吸收光譜時需注意以下幾項：

1. 蛋白需要溶解完全，任何蛋白的沉淀會給濃度的測量和計算帶來偏差。

2. 吸光度的讀數(shù)不應(yīng)該超過儀器的量程，導(dǎo)致吸收曲線出現(xiàn)平臺。如果出現(xiàn)這種情況，應(yīng)該稀釋蛋白溶液再進(jìn)行測量。

3. 此蛋白濃度計算式是采用 1cm 標(biāo)準(zhǔn)光程作為基準(zhǔn)，應(yīng)使用 1cm 寬的石英比色皿，如果使用其它尺寸的分光皿，所測的值應(yīng)予校正。

蛋白濃度計算原理

示意圖

注：濃度計算所需的所有數(shù)據(jù)均根據(jù)實際實驗及所選蛋白進(jìn)行調(diào)整（消光系數(shù)及分子量會根據(jù)您在計算工具中的蛋白選擇而自行調(diào)整）。計算工具鏈接：https://www.aatbio.com/tools/calculate-protein-concentration

操作步驟

1.選擇所要分析的蛋白，如果不是選項中的蛋白，請選擇 "custom sequence"，然后輸入蛋白氨基酸序列。

2.輸入最大吸收的波長。蛋白一般最大吸收在 280 nm。但是，不同蛋白有不同的最大吸收波長，請按儀器所測的最大吸收波

長為準(zhǔn)，輸入最大吸收峰處的波數(shù)。

3.如果測量使用的蛋白溶液是已稀釋的溶液，請輸入稀釋的倍數(shù)，用以計算蛋白的原始濃度。

4.如果所使用的比色皿的光程不是 1cm，請輸入正確的光程。

5.點擊 "計算" 后即可顯示蛋白濃度。